液相色譜中鬼峰(非樣品來源的異常峰)的產生涉及多因素交互作用，需從流動相制備、系統維護、操作規范等環節進行系統性控制。以下是綜合解決方案：
一、流動相污染控制
1. 溶劑與水質管理
- 必須使用HPLC級乙腈或甲醇(紫外吸收干擾較小)，禁止使用普通蒸餾水。水相需現用現配，并添加溶液抑制微生物滋生。
- 有機溶劑(如甲醇、乙腈)開瓶后需密封避光保存，防止揮發性雜質混入。
2. 配制流程優化
- 嚴格遵循“先混勻后過濾”原則：先將溶劑按比例混合，再用0.45μm濾膜過濾，避免因過濾產生氣泡引入雜質。
- 緩沖鹽溶液建議每周更換，高鹽濃度流動相使用后立即用純水沖洗系統，防止鹽析出結晶。
二、系統污染預防與維護
1. 管路清潔與滅菌
- 每日實驗結束后，用純水沖洗系統30分鐘，再用甲醇封存，避免鹽分殘留。
- 每周用5%硝酸浸泡管路12小時殺滅微生物，尤其注意過濾器、單向閥等死角部位。
2. 色譜柱專項維護
- 每月用甲醇-異丙醇(4:6)反向沖洗色譜柱30分鐘，清除柱頭吸附的污染物。當理論塔板數下降超過20%時，需更換填料。
- 長期不用時，色譜柱應充滿甲醇后密封保存，避免固定相干裂。
3. 檢測器與流通池保養
- 檢測池氣泡可通過提高流速沖洗或輕敲池體排出；若無效，需拆卸超聲清洗。
- 氘燈老化會導致基線噪聲增大，每年至少更換一次以保證光源穩定性。
三、梯度方法與參數優化
1. 梯度程序設計
- 縮小流動相A/B相的比例差(如A相從90%水降至70%水)，降低因洗脫強度突變引發的氣泡風險。
- 延長平衡時間至≥10倍柱體積，確保柱頭穩定后再進樣。
2. 壓力與流速調控
- PEEK管路限壓4000psi，遇四氫呋喃(THF)等強溶劑需切換為不銹鋼管線。
- 發現壓力波動時，優先排查單向閥是否堵塞(可用丙酮超聲清洗)。
四、樣品前處理與操作規范
1. 樣品凈化
- 復雜基質樣品需經0.22μm濾膜過濾或離心處理，杜絕顆粒物進入系統。
- 溶解樣品應采用初始流動相，避免強溶劑效應導致鬼峰。
2. 進樣系統管理
- 進樣閥每次使用后用強溶劑(如乙腈)清洗，消除殘余峰干擾。
- 定量環污染時，可連續注入空白溶劑驗證并沖洗。
五、高級技術應用
1. 鬼峰捕獲裝置
- 在混合器與進樣器之間加裝專用鬼峰去除柱，可有效吸附流動相雜質，耐受600次以上分析仍有效。需注意離子對試劑會縮短其壽命，需定期更換。
