早期使用隔膜和停流進樣器，裝在色譜柱進口處。現在大都使用六通進樣閥或自動進樣器。 進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。HPLC進樣方式可分為：隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。
1.隔膜進樣。用微量注射器將樣品注進專門設計的與色譜柱相連的進樣頭內，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎即是零，可以獲得*的柱效，且價格便宜，操縱方便。但不能在高壓下使用(如10MPa以上);此外隔膜輕易吸附樣品產生記憶效應，使進樣重復性只能達到1~2%;加之能耐各種溶劑的橡皮不易找到，常規分析使用受到限制。
2.停流進樣。可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現“鬼峰”;另一缺點是保存時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。
3.閥進樣。一般HPLC分析常用六通進樣閥(以美國Rheodyne公司的7725和7725i型zui常見)，其關鍵部件由圓形密封墊(轉子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效率低于隔膜進樣(約下降5~10%左右)，但耐高壓(35~40MPa)，進樣量正確，重復性好(0.5%)，操縱方便。
4.自動進樣。用于大量樣品的常規分析。
